1) 测定大分子蛋白质样品(比如抗体类药物)分子量; 2) 得到蛋白质样品(约10-150KDa)的精确分子量; 3) 分析蛋白质的修饰状态(比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情况等),并进行定量分析。
试品经酶解后进入HPLC,根据肽段不同保留时间进行分离,洗脱下来的肽段进入质谱进行检测。根据质谱检测器采集的质谱结果和数据分析软件,可以确认HPLC质量肽图中紫外吸收峰所对应的肽段。 ICH Q6B要求提供质量肽谱图确认氨基酸序列。
应用 · 工艺优化:一级结构鉴定/修饰位点分析 · 生物类似药:和原始抗体的序列和修饰比较
糖谱测定是生物药开发项目的重要部分。在工艺开发、制造纯化、剂型开发和稳定性测试等过程中需检测糖基结构与相对含量。
目前,对蛋白质肽段覆盖率的检测根据药物申报要求的规定,均采用质谱法进行检测。 目前 常规抗体、蛋白质类、疫苗等药物的肽段覆盖率可达到 100%
分析内容 1) 参比品理论配对二硫键肽段鉴定 2) 参比品与各批次供试品二硫键肽段一致性分析
及色谱峰容量。超高效液相色谱是一个新兴的领域,作为世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLCTM 超高效液相色谱系统在1996年问世,之后像安捷伦、岛津等公司也陆续开始生产
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